丹参乙酸镁(magnesium lithospermate B, MLB)为传统中药丹参中最重要的水溶性有效活性物质[12]，具有抗氧化、清除自由基[34]、保护心、肝、肾功能损伤的作用，并影响血栓形成和ATP酶活性[58]。M1(3′Omonomethyllithospermic acid B)和M2(3′, 3′′Odimethyl lithospermmic acid B)为丹参乙酸镁的两种主要代谢产物，亦具有抗氧化的作用[9]。在本研究中我们通过对M1和M2在体内的药代动力学规律研究，以期为丹参有效成分的临床应用提供实验依据。
1 材料与方法
1.1 仪器 API3000串联质谱仪(美国应用生物系统公司生产)；日本岛津高效液相色谱仪，包括2台LC10AD泵、在线脱气机及SILHTC自动进样器；XW80A旋涡混合器(上海医科大学仪器厂生产)；802B台式离心机(上海安亭科学仪器厂生产)；气体吹干装置(江苏太仓医用器械厂生产)；自动双重纯水蒸馏器(上海玻璃仪器公司和上海申科机械研究所生产)。
1.2 药品与试剂 丹参乙酸镁代谢产物对照品M1含量92.9%，M2含量90.4%，内标物水飞蓟素含量≥98%，均由中国科学院上海药物所植物化学研究室提供(图1)。乙腈(Fisher试剂公司，色谱纯)；甲酸、丙酮、乙酸乙酯(Sigma公司，分析纯)；水(自制重蒸水)。
图1 M1、M2和IS的结构图（略）
Fig.1 Chemical structure of M1, M2 and Silibinin (IS)
1.3 实验动物 雄性SD大鼠，体重约250g，由中科院上海实验动物中心提供(许可证号：No.SCXK 20030003)。实验前大鼠禁食12h。
1.4 实验方案 SD大鼠12只，平均分为2组，分别股静脉注射M1和M2 20mg/kg，静注给药时间为20s，给药前及给药后0.033、0.133、0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、3、5、8h从尾静脉采血进行药代动力学研究。 血样采集后均4℃放置2h后4000g×10min离心得血清样品，置-80℃冷冻保存待测。临用前按样品预处理方法处理后进样测定血药浓度。
1.5 血清中代谢物M1和M2含量测定
1.5.1 贮备液 精密称取M1、M2和水飞蓟素适量，用甲醇分别配制成质量浓度为1g/L的贮备液。置于4℃冰箱内保存。
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